逆轉錄聚合酶鏈式反應
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逆轉錄PCR，或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)，是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成爲互補DNA，再以此爲模板通過PCR進行DNA複製。
由一條RNA單鏈轉錄爲互補DNA(cDNA)稱作“逆轉錄”，由依賴RNA的DNA聚合酶（逆轉錄酶）來完成。隨後，DNA的另一條鏈通過脫氧核苷酸、引物和依賴DNA的DNA聚合酶完成，隨每個循環倍增，即通常的PCR过程。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互補DNA。
RT-PCR的指數擴增是一種很靈敏的技術，可以檢測很低拷貝數的RNA。RT-PCR廣泛應用於遺傳病的診斷，並且可以用於定量監測某种RNA的含量。（檢測基因表達的方法，參見北方墨點法。）
用途
[编辑]实时荧光RT-PCR可用于检测确诊嚴重急性呼吸系統綜合症冠狀病毒2型（2019新型冠状病毒）。[1]
參考文獻
[编辑]- ^ Torretta, Sara; Zuccotti, Gianvincenzo; Cristofaro, Valentina; Ettori, Jacopo; Solimeno, Lorenzo; Battilocchi, Ludovica; D’Onghia, Alessandra; Bonsembiante, Anna; Pignataro, Lorenzo; Marchisio, Paola; Capaccio, Pasquale. Diagnosis of SARS-CoV-2 by RT-PCR Using Different Sample Sources: Review of the Literature. Ear, Nose & Throat Journal. 2021-04, 100 (2_suppl) [2024-01-10]. ISSN 0145-5613. PMC 7459180
. PMID 32865458. doi:10.1177/0145561320953231. （原始内容存档于2024-01-10） （英语）.
外部連結
[编辑]- RT-PCR protocols from Penn state University （页面存档备份，存于互联网档案馆）
- Database of validated PCR primer sets （页面存档备份，存于互联网档案馆） (website critique)
- Animation to illustrate RT-PCR procedure, from Cold Spring Harbor Laboratory （页面存档备份，存于互联网档案馆）
- The Reference in qPCR -- an Academic & Industrial Information Platform （页面存档备份，存于互联网档案馆）
- www.eConferences.de -- Amplify your knowledge in qPCR, dPCR and NGS! （页面存档备份，存于互联网档案馆）
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